上海恒远生物科技有限公司
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一、参数规格
【产品名称】：人基质金属蛋白酶9(MMP-9)ELISA试剂盒
【检测种属】：人、大鼠等动植物。
【产品用途】：被测样品定性或定量分析
【产品规格】：96T/48T(两种规格)
【检测方法】：酶免法/酶联免疫法(ELISA)
【保存条件】：2-8℃
【供 货 期】：1-3天(现货供应)
【产品性状】：液体盒装
【服务X势】：全程提供ELISA实验技术指导和ELISA试剂盒免费代测
【样本储存】：收集标本前必须清楚要检测的成份是否足够稳定。对收集后当天进行检测的标本，储存在4℃备用，如有特殊原因需要周期收集标本，将标本及时分装后放在-20℃或-70℃条件下保存。避免反复冻融。标本2-8℃可保存48小时，-20℃可保存1个月。-70℃可保存6个月。部分激素类标本需添加抑肽酶。
二、人基质金属蛋白酶9(MMP-9)ELISA试剂盒X势体现
1、高效、灵敏、特异的抗体；
2、稳定的重复性和可靠性；
3、吸附性能好，X值低，孔底透明度高的固相载体；
4、适用血清、血浆、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等等多种标本类型；
5、种属齐全：人（Human） 、大鼠（Rat） 、小鼠（Mouse） 、猴（Monkey） 、兔（Rabbit）、
猪（Pig） 、马（Horse） 、鱼、鸡、鸭、羊等等；
6、可检测指标齐全：细胞因子检测、心肌梗塞检测、内分泌检测、肝纤维化检测、自身免疫检测、肿瘤标志物检测、传染病检测、特种蛋白检测、X生X育检测等等；
7、X大限度的节省实验经费；
选择余地
8、进口分装：可靠的实验结果，且还具有X廉的价格，更经济实惠；
9、原装进口：X质的质量，高的灵敏度、精密度、重现性、特异性，帮您在实验室更加节省时间；
全面的技术服务
10、从标本收集、保存、预试验、实验、数据分析等全实验过程提供完整的技术指导。
提供免费代测服务（为您节省时间），欢迎向我司业务人员索取各 ELISA 试剂盒的产品说明书。
11.公司所有产品均含税含运费，快递免费送货上门。
三、人基质金属蛋白酶9(MMP-9)ELISA试剂盒操作步骤
1. 标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀
释。
240ng/L 5 号标准品 150μl 的原倍标准品加入150μl 标准品稀释液
120ng/L 4 号标准品 150μl 的5 号标准品加入150μl 标准品稀释液
60ng/L 3 号标准品 150μl 的4 号标准品加入150μl 标准品稀释液
30ng/L 2 号标准品 150μl 的3 号标准品加入150μl 标准品稀释液
15ng/L 1 号标准品 150μl 的2 号标准品加入150μl 标准品稀释液
2. 加样：分别设X孔（X对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、
待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，
然后再加待测样品10μl（样品X终稀释度为5 倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽
量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30 分钟。
4. 配液：将30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水30 倍稀释后备用
5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30 秒后弃去，如此重复5 次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶标试剂50μl，X孔除外。
7. 温育：操作同3。
8. 洗涤：操作同5。
9. 显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15 分钟.
10. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
11. 测定：以X空调零，450nm 波长依序测量各孔的吸光度（OD 值）。 测定应在加终止液后15 分钟以内进行。
四、Elisa实验包被的方式
将抗原或抗体固定在过程称为包被 (coating)。换言之，包被即是抗原或抗体结合到固相载体表面的过程。蛋白质与聚苯乙烯固相载体是通过物理吸附结合的，靠的是蛋白质分子结构上的疏水基团与固相载体表面的疏水基团间的作用于。这种物理吸附是非特异性的，受蛋白质的分子量、等电点、浓度等的影响。
载体对不同蛋白质的吸附能力是不相同的，大分子蛋白质较小分子蛋白质通常含有更多的疏水基团，故更易吸附到固相载体表面。IgG 对聚苯乙烯等固相具有较强的吸附力，其联结多发生在Fc 段上，抗体结合点暴露于外，因此抗体的包被一般均采用直接吸附法。蛋白质抗原大多也可采用与抗体相似的方法包被。
当抗原决定簇存在于或邻近于疏水区域时，抗原与固相载体的直接吸附可使抗原决定簇不能充分暴露，在这种情况下，直接包被效果不佳，可以采用间接的捕获包被法，即先将针对该抗原的特异抗体作预包被，其后通过抗原抗体反应使抗原固相化。此间接结合在固相上的抗原远离载体表面，其抗原决定簇也得以充分露。间接包被的抗原经固相抗体的亲和层析作用，包被在固相上的抗原纯度大大提高，因此含杂质较多的抗原也可采用捕获包被法(见2.2.4)，试验的特异性、敏感性均由此得以改善，重复性亦佳。间接包被的另一X点是抗原用量少，仅为直接包被的1/10 乃至于/100。不易吸附在聚苯乙烯载体上的非蛋白质抗原可采用特殊的包被方式。例如，在检测抗DNA 抗体时，需用DNA 作为包被抗原，而普遍的固相载体一般不能直接与核酸结合。可将聚苯乙烯板先经紫外线照射(例如 30W 紫外灯，75cm 照射12 小时)，以增加其吸附性能。固相载体先用碱性蛋白质，如聚赖氨酸、鱼精蛋白等作预包被，也可提高核酸的结合力。也可用亲和素生物素系统作间接包被，即用亲和素先包被载体，然后加入生物素化的 DNA，这种包被方法均匀、牢固，已扩大应用于各种抗原物质的定量测定。脂类物质无法与固相载体结合，可将其在有机溶剂(例如乙醇)中溶解后加入 ELISA 板孔中，开盖置冰箱过夜或冷风吹干，待酒精挥发后，让脂质自然干固在固相表面。抗心磷脂抗体的ELISA 试剂一般采用这种包被方式。
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