上海恒远生物科技有限公司
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试剂参数规格
产品名称：T4 DNA连接酶
英文名称：T4 DNA Ligase
CAS号：9015-85-4
分子量：55.3kDa，单体
X别： BR
来源：含有T4噬菌体克隆基因30的大肠杆菌
浓度：30Weiss u/ul(6000CEU/ul）
活性定义：是指在ATP-PPi交换反应中，37℃、30分钟内将1nmol [32PPi]转换为Norit可吸收形式所需的酶量（weiss单位，1个weiss单位相当于约200个粘性末端连接单位。1个粘性末端连接单位：20ul反应体系（50mM Tris-HCL(PH7.5), 10mM DTT, 10mM MgCL2, 1mM ATP, 25ug/ml BSA, 12uM(300ug/ml)的5-DNA末端）中，在16℃、30分钟内连接50%连接HindIII酶切的Lambda DNA 产物所需的酶量）
酶活性分析混合物：66mM Tris-HCL(PH7.6), 10mM DTT, 6.6mM MgCL2, 0.066mM ATP, 3.3uM[32PPi]
保存液组分：20mM Tris-HCL(PH7.5), 50mM KC1, 1mM DTT，0.1mM EDTA和50%(v/v)甘油
10×T4 DNA Ligase缓冲液（#B69）：400mM Tris-HCL, 100mM MgCL2, 100mM DTT, 5mM ATP(PH7.5,25℃)
抑制剂：当反应体系中NaC1或KC1的浓度X过200 mM时，可强烈抑制T4 DNA Ligase活性
失活：65℃加热10分钟或70℃加热5分钟
注意：T4 DNA Ligase与DNA结合会改变条带的琼脂糖凝胶电泳迁移率，为避免此现象，电泳前需处理样本或分子量标准。样本处理如下：样本与Fermentas公司6×DNA Loading Dye&SDS溶液（#R1151）混合，75℃加热5分钟或65℃加热10分钟后冰浴保存；转化时，连接产物的体积不得X过感受态细胞体积中的10%；电转化之前，先用lvfang抽提方法除去连接混合物中的T4 DNA Ligase，然后经乙醇沉淀纯化抽提产物
质量控制：测试表明无内切脱氧核糖核酸酶、核糖核酸酶、磷酸酶污染。功能检测：粘性末端或平末端DNA的连接能力
性状：液体。该酶催化双链DNA或RNA中毗邻的5磷酸基团和3-羟基末端之间形成磷酸二酯键，还可以修复双链DNA、RNA或DNA/RNA复合体中的单链切口，连接DNA的粘性和平末端，但该酶对单链核酸无酶活性。该酶需要辅因子ATP
用途：生化研究。粘性末端或平末端双链DNA的连接；双链寡核苷酸接头与双链DNA连接；双链DNA、RNA或DNA-RNA复合体中缺口的修复；连接酶介导的RNA检测；位点特异性突变；扩增片段长度多态性
保存： -20°C
我公司为您提供高品质生物试剂， 供实验室科研使用，涉及品牌有Amresco、Sigma、Spectrum等，原装X！价格X惠，质量保证。
Spectrum进口试剂管理窍门
一般按用途可以分为通用试剂、高纯试剂、分析试剂、仪器分析试剂、临床诊断试剂、生化试剂、无机离子显色剂试剂等。有四种常用规格：
1. XX纯或一X品(GR 精密分析和科学研究工作)；
2. 分析纯或二X品(AR 重要分析和一般研究工作)；
3. 化学纯或三X品(CP 工矿及学校一般化学实验)；
4. 实验试剂(L.P.)。
大多数的试剂具有一定的毒性及危险性。对科研试剂的加强管理，不仅是保证分析结果质量的需要，也是确保人民生命财产安全的需要。Spectrum进口试剂应根据毒性、易燃性、腐蚀性和潮解性等不同的特点，以不同的方式妥善管理
T4 DNA连接酶性能评价方法主要性能指标：
1. 稳定性：指在规定条件下经过一段时间的保存，仍能达到相应的性能指标，如试剂X 吸光度、线性范围、灵敏度等。
2. 反应灵敏度：指单位浓度(或活性)的测定物反应所产生的反应度，反应度越高，灵敏度 越大。
3. 精密度：结果间相互符合的一致程度
4. 准确度：与参考测定程序结果的一致性
5. 线性范围：在规定的重复性和线性偏差下，测得的浓度或活性值与设定的浓度或活性值 之间的比例关系的范围。
6. 基质效应：基质指的是样品中被分析物以外的组分。基质常常对分析物的分析过程有显 著的干扰，并影响分析结果的准确性。例如，溶液的离子强度会对分析物活度系数有影响，这些影响和干扰被称为基质效应（matrix effect）。
7. 抗干扰性：
8. 其它：试剂/样本比例、反应时间、价格等。
实验室化学试剂的存放
化学试剂都应存放在试剂瓶里，塞紧瓶盖子，放置牢固橱柜架上，以保安全。且放置应排列整齐有序，并方便取用。所有化学试剂均应粘贴标签，标明试剂溶液 的明称、浓度和配制时间。标签大小应与试剂瓶大小相适应，字迹应清晰，字体书写端正，并粘于瓶子中间部位略偏上的位置，使其整齐美观，标签上可以涂以熔融 石蜡保护。保存化学试剂要特别注意安全，放置试剂的地方应阴凉，干燥，通风良好。因试剂的种类多种多样，一般试剂按无机物和有机物两大类进行分类存放，特 殊试剂及危险试剂另存。
1无机物化学试剂的存放
按盐类、单质、氧化物、碱类、酸类等类别分别存放。盐类一般按金属离子所在周期表中的位置，也是从左向右，先下盐后酸式盐的方法分类: 如钠盐—硫化钠、碳酸钠、硅酸钠、亚硝酸钠、硫酸钠、硫代硫酸钠、钙盐等。单质再分成金属和非金属类或以单质元素在元素周期表中的族分类。氧化物也按元素 周期表的族的顺顺序分类。酸类中的不含氧酸可按酸根元素在周期表中的族次由左向右，从上到下来分类: 如氢卤酸、氢氟酸、盐酸、氢溴酸、氢碘酸等。含氧酸可按成酸元素的族次分类: 硼酸、硝酸、硫酸、磷酸等。碱类主要按碱可中金属元素在周期表中的族次分类: 如氢氧化钠、氢氧化钾、氢氧化镁、氢氧化钙等。
2有机物化学试剂的存放
按官能团分类: 如烃类 ( 饱和烃、不饱和烃) ，烃的衍生物 ( 醇、醛、酮、酸、醚、酯) ，碳水化合物，含氮化合物，有机离分子化合物等。每种试剂应按纯度X别依次排列，配制的溶液应与固体试剂分别存放。
T4 DNA连接酶安全操作：
操作实验时，环境请保持：
1. 实验室的标准温度为20℃,一般检测间及试验间的温度应在20±5℃， 线值计量标准间为20±2℃，电工与无线电X的标准间和线值计量的计量检测仪器间为20±3℃。
2. 实验室内的相对湿度一般应保持在50－70%。
3. 实验室的噪音、防震、防尘、X、防磁与屏蔽等方面的环境条件应符合在室内开展的检定项目之检定规程和计量标准器具及计量检测仪器设备对环境条件的要求，室内采光应利于检定工作和计量检测工作的进行。
临床生化诊断试剂盒的选择要求
目前很多医院检验科试剂招标后，一般会选择三家入围的厂家试剂进行试用，而对于试用新使用的试剂盒一般测试指标有：
（一）准确度
通常以回收率、定值血清的靶值范围、对照试验及干扰试验的结果来分析判断：
1．回收试验 回收率越接近100%，准确率越高，一般以100%±5%为合格
2．定值血清的测定 对于某些无法准确加入标准物的试剂盒，可用低、中、高浓度的定值血清进行测定，测得值符合定值血清的靶值范围（±2S）为合格
3．对照试验 将被检试剂盒与公认的参考方法同时测定若干样本（一般要求100份，X少需30份），计算两组结果的相关系数和直线回归方程
4．非特异性与干扰试验 对维生素C、黄疸、溶血、乳糜等因素的耐受程度，干扰值越小越好
（二）精密度
试剂的瓶间差异、批内精密度和批间差异三组测定的平均值之间应无显著差异，否则，试剂盒的均一性不符合要求：
1．瓶间差异 同一试剂盒，取10瓶试剂复溶，测定同一样品的含量，求平均值、标准差、变异系数。
2．批内精密度 同一样品用同一瓶试剂测定10次，求平均值、标准差、变异系数
3．批间差异 同一样品，用不同批号的10瓶试剂测定，求平均值、标准差、变异系数
（三）线性范围
指该试剂盒按其说明使用时可准确测量的范围。被检样品的含量X出测定线性范围，必须改变样品与试剂体积的比例，重新测定才能得到准确结果。试剂盒的测定线性范围是衡量试剂盒质量的一个指标，也是正确使用该试剂盒的关键之一。
（四）抗干扰作用
双试剂型试剂盒主要X点是抗干扰作用。
（五）灵敏度
在终点法灵敏度以特定波长下25px光径时单位浓度的吸光度值表示。
（六）稳定性
试剂盒稳定性是指试剂盒在规定条件下储存仍保持其性能指标的期限。方法有以下三种。
1．原包装试剂的稳定性
2．复溶后试剂的稳定性
3．不同温度下的保存期
T4 DNA连接酶X点：
全：公司提供上万种产品，涵盖了生物试剂，elisa试剂盒，标准品，培养基，原装耗材，抗体、培养基、ATCC细胞等，基本上各种科研所需产品在我司都能找到。
新：产品更新速度较快，基本上每周都有新产品出现。
X：产品质量好，投诉比较少。
品：公司长期代理sigma,amresco,oxoid,wako,R&D,TCI,GIBIO,等国内外X品牌。
好：我公司具有X质的技术团队，产品一旦售出，实验过程中遇到困难可提供在线技术咨询。
订购X势：
1. 手续简单：无需单证，货物发到我司仓库后，手续全部有我们办理。
2. 清关速度快：仓库到上海2-4个工作日左右。
3. 价格实惠：市场价之间给出8折X惠。
4. 安全有保障：有正规手续报关，货物运输前可签到运输协议。
5. 复溶后或液体试剂的pH应符合标准规定。
