产品名称：ANF,大鼠心钠素ELISA试剂盒技术指导
合作单位：高校/医院/科研院；
实验类型：夹心法/间接法/竞争法；
反应时间: 1-5h
所需样本体积: 50-100ul
检测波长: 450 nm
应用范围：用于体外定量检测血清、血浆、组织、细胞上清及相关液体样本；
保存条件：2-8℃；
郑重声明：本产品仅供科研实验，不适用于临床诊断！
更多产品：
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相关小分子检测系列：皮质醇类试剂盒,HCY类试剂盒,T3,T4类试剂盒；
抗体检测系列：链球菌溶血素o抗体ELISA检测试剂盒,AQP-Ab类试剂盒,HINI试剂盒；
特种蛋白检测：近十个种属的白蛋白,球蛋白ELISA检测试剂盒。
样本处理及要求
1. 血清：全血标本请于室温放置2小时或4℃过夜后于1000g离心20分钟，取上清即可检测，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
2. 血浆：可用EDTA或肝素作为抗凝剂，标本采集后30分钟内于2 - 8°C 1000g离心20分钟，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
3. 组织匀浆：用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织，去除残留血液（匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果），称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS（一般按1:9的重量体积比，比如1g的组织样品对应9mL的PBS，具体体积可根据实验需要适当调整，并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂）加入玻璃匀浆器中，于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞，可以对匀浆液进行X声破碎，或反复冻融。X后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟，取上清检测。
4. 细胞培养物上清或其它生物标本：1000g离心20分钟，取上清即可检测，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
注：标本溶血会影响X后检测结果，因此溶血标本不宜进行此项检测。
ANF,大鼠心钠素ELISA试剂盒技术指导操作步骤
1. 从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2. 设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL；
3. 样本孔中加入待测样本50μL；X孔不加。
4. 除X孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5. 弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液（350μL），静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）。
6. 每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入终止液50μL，15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值。
