实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人γ干扰素(IFN-γ)水平。用纯化的人γ干扰素(IFN-γ)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入γ干扰素(IFN-γ)，再与HRP标记的羊抗人受体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的γ干扰素(IFN-γ)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人γ干扰素(IFN-γ)含量。
试剂盒组成
1
20倍浓缩洗涤液
50ml×1瓶
7
终止液
6ml×1瓶
2
酶标试剂
6ml×1瓶
8
标准品（150μg/L）
0.5ml×1瓶
3
酶标包被板
12孔×8条
9
标准品稀释液
1.5ml×1瓶
4
样品稀释液
6ml×1瓶
10
说明书
1份
5
显色剂A液
6ml×1瓶
11
封板膜
2张
6
显色剂B液
6ml×1/瓶
12
密封袋
1个
标本处理及要求
1．血清、血浆、脑脊液、腹腔液标本可直接测定；
2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
3．采集后尽早进行实验，若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融。
操作步骤
标准品的稀释与加样：在酶标包被板上设标准品孔10孔，在*、X二孔中分别加标准品100μl，然后在*、X二孔中加标准品稀释液50μl，混匀；然后在*孔和X二孔中先各取50μl弃掉；再各取50μl分别加到X三孔和X四孔，再在X三、X四孔分别加标准品稀释液50μl，混匀后，再各取50μl分别加到X五、X六孔中，再在X五、X六孔中分别加标准品稀释液50ul，混匀；混匀后从X五、X六孔中各取50μl分别加到X七、X八孔中，再在X七、X八孔中分别加标准品稀释液50μl，混匀后从X七、X八孔中分别取50μl加到X九、X十孔中，再在X九X十孔分别加标准品稀释液50μl，混匀后从X九X十孔中各取50μl弃掉。（稀释后各孔加样量都为50μl，浓度分别为100μg/L，50μg/L ，25μg/L，12.5μg/L，6.25μg/L）。
加样：分别设X孔（X对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品zui终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
配液：将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用
洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
加酶：每孔加入酶标试剂50μl，X孔除外。
温育：操作同3。
洗涤：操作同5。
显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.
终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
测定：以X空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
计算
以标准物的浓度为横坐标（对数坐标），OD值为纵坐标（普通坐标），在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。
注意事项
1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。
2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。
3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间zui好控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。
请每次测定的同时做标准曲线，zui好做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔OD值的1.5倍），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请zui后乘以总稀释倍数（×n×5）。
封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
6．底物请避光保存。
7．试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9．本试剂不同批号组分不得混用。
10. 如与英文说明书有异，以英文说明书为准。
检测范围：
5μg/L -150μg/ml
规格：
96人份/盒
保存条件及X期
1．试剂盒保存：；2-8℃。
2．X期：6个月
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